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植物凝胶&琼脂怎么选择?
日期:2020/9/10 访问:

一、关于植物凝胶:

  植物凝胶由假单胞菌分泌而来,是葡萄糖醛酸、鼠李糖和葡萄糖等的混合物,其形成的凝胶具有无色、透亮和高韧性的特点;其克服了传统琼脂在植物组织培养中的固有缺陷,是配制植物组织培养基和微生物培养基的不二选择。

  植物凝胶的成胶需要二价阳离子的存在,且对pH敏感。一般植物培养基中的钙离子和镁离子的浓度足以让植物凝胶凝固,钙镁离子减少应适当增加植物凝胶的用量;植物培养基一般调pH至5.8,pH低于5.5会严重影响植物凝胶凝固。微生物学研究所用的低盐培养基,通常需要另外加入钙盐、镁盐或提高植物凝胶的加入浓度。植物凝胶常用工作浓度:MS培养基为例2.5-4 g/L;1/2MS培养基3-5 g/L。微生物培养基10 g/L。

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二、关于琼脂:

  琼脂,学名琼胶,英文名(agar),又名洋菜(agar-agar)、海东菜、冻粉、琼胶、石花胶、燕菜精、洋粉、寒天、大菜丝,是植物胶的一种,常用海产的麒麟菜、石花菜、江蓠等制成,为无色、无固定形状的固体,亦常用作细菌培养基。为什么叫琼脂,主要是用海南的麒麟菜或石花菜制作出来的。海南的简称就是琼。

  琼脂的最有用特性是它的凝点和熔点之间的温度相差很大。它在水中需加热至95℃时才开始熔化,熔化后的溶液温度需降到40℃时才开始凝固,所以它是配制固体培养基的最好凝固剂。用琼脂配制的固体培养基,可用以进行高温培养而不熔化,在凝固之前接种时,也不致将培养物烫死。因此,琼脂是制备各种生物培养基中应用最广泛的一种凝固剂。植物组培培养基中常用浓度在0.7%左右(视琼脂强度而定),而微生物培养基通常1.5%左右,对于偏酸性(pH小于6)的微生物培养基一般用到2%左右。

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三、植物凝胶与琼脂的区别:

1、植物凝胶和琼脂都对酸性条件敏感,培养基pH不宜低于5.5,应适当添加使用量,pH值过低则完全不凝结。

2、植物凝胶对钙、镁等二价阳离子有浓度要求,琼脂则没有,植物培养基钙、镁离子不足应适当增加植物凝胶使用量。

3、植物凝胶保质期短,产品使用后应避光防潮保存。要求开封后一年内用完。琼脂可长期储存,对环境要求不高。

4、植物凝胶用量小,但价格贵。

5、植物凝胶成胶后透明度好,琼脂凝胶透明度差。

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四、植物组培培养基的配制方法:

1、按要求溶解培养基基础盐和糖类,调pH至5.8;

2、加入适量植物凝胶或琼脂,121℃,灭菌15-20分钟;

3、冷却至50-60℃,按实验要求加入植物激素或抗生素,混匀;

4、倒入培养瓶或者培养管,冷却,凝固后接入外植体。

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